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小麥醇溶蛋白ELISA試劑盒是用于檢測(cè)植物組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小麥醇溶蛋白含量的重要工具。使用前，需將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出，室溫平衡15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)時(shí)，采用雙抗體夾心法，將純化的小麥醇溶蛋白抗體包被微孔板，加入樣本及HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后，加底物TMB顯色，顏色深淺與樣品中小麥醇溶蛋白含量正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中小麥醇溶蛋白濃度。注意，實(shí)驗(yàn)過(guò)程需避免交叉污染，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作，且不同批號(hào)組分不得混用。試劑盒保存于2-8℃，有效期6個(gè)月。
BS-5040 小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒 天津本生
以下是小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)：
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法：用純化的Gliadin抗體包被微孔板，依次加入樣本/標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。TMB顯色后在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值，顏色深淺與Gliadin濃度呈正相關(guān)?。
二、試劑盒組成
組分 96孔配置 48孔配置
酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條
標(biāo)準(zhǔn)品(16μg/mL) 0.5mL×1瓶 0.5mL×1瓶
酶標(biāo)試劑 6mL 3mL
顯色劑A/B 各6mL 各3mL
終止液 6mL 3mL
30×洗滌液 20mL 15mL ?
三、樣本處理要求
血清/血漿?：采集后1000×g離心10-30分鐘，避免溶血?
細(xì)胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒?
組織勻漿?：用生理鹽水勻漿后離心取上清?
保存?：-20℃短期保存，-70℃長(zhǎng)期保存，避免反復(fù)凍融?
四、操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液進(jìn)行梯度稀釋(建議濃度：0、0.2、1、4、9μg/mL)?
加樣?：
空白孔：不加樣
標(biāo)準(zhǔn)孔：50μL標(biāo)準(zhǔn)品
樣本孔：40μL稀釋液+10μL樣本(5倍稀釋)?
溫育?：37℃孵育30分鐘?
洗滌?：用稀釋后的洗滌液洗板5次，每次靜置30秒?
顯色?：每孔加顯色劑A/B各50μL，37℃避光反應(yīng)10分鐘?
終止?：每孔加50μL終止液?
檢測(cè)?：450nm波長(zhǎng)讀取OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算濃度?
五、注意事項(xiàng)
安全防護(hù)?：避免接觸終止液/顯色劑，操作時(shí)穿戴防護(hù)裝備?
試劑保存?：
未開(kāi)封試劑盒2-8℃保存
開(kāi)封后酶標(biāo)板需密封防潮?
質(zhì)量控制?：
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔CV應(yīng)<15%
樣本OD值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍內(nèi)?
六、技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)范圍?：0.2-9μg/mL(96T)?
靈敏度?：<0.1μg/mL?
有效期?：6個(gè)月(2-8℃保存)?
(注：不同品牌試劑盒可能存在細(xì)微差異，請(qǐng)以實(shí)際產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn))
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